Ako vykonávať odhady krvných doštičiek

Schopnosť odhadnúť počet trombocytov je základnou zručnosťou pri práci v laboratóriu. Krvné doštičky sú fragmenty cytoplazmy, ktoré pomáhajú zrážaniu krvi. Počet trombocytov sa používa na stanovenie trombocytopénie (nízky počet krvných doštičiek) a trombocytózy (vysoký počet krvných doštičiek). Podľa Národného zdravotného ústavu je normálny počet krvných doštičiek medzi 150 000 až 400 000 krvných doštičiek na jeden mikrolitr krvi. Trombocytopénia je spojená s aplastickou anémiou, deficitom folátu, deficitom vitamínu B12 a akútnymi leukémiami. Trombocytóza je spojená s hemolytickou anémiou a polycytémia vera (nadmerná tvorba červených krviniek).

$config[code] not found

Zrieďte vzorku krvi v pomere 1: 100 krvi k riedidlu (oxalát amónny). Odstráňte pipetu z jej krytu asepticky zatlačením špičky krytu pipety cez membránu v hrdle nádrže. Dotknite sa pery pipety do krvi a nechajte pipetu naplniť krvou. Otvorte kryt pipety s ukazovákom a pipetujte do krčka nádržky. Uvoľnite tlak na zásobník a vyberte ukazovák z pipety. Nechajte stáť 10 minút, aby sa červené krvinky mohli hemolyzovať.

Vyplňte hemocytometr, ktorý je sklenenou stranou s počítací komorou obsahujúcou merané čiary známej hĺbky, s krvou stláčaním strán nádrže; potom umiestnite hemocytometr do krytej Petriho misky a nechajte 10 minút stáť. Položte hemocytometr na javisko (plošná plošina používaná na montáž sklíčka) jasného svetla alebo fázového mikroskopu a zahnite ohniskovú oblasť hemocytometra pomocou objektívu s nízkym výkonom.

Prepnite na objekt 43X, aby ste zväčšili zväčšenie a aby ste zaostrili veľké centrálne štvorec hemocytometra. Vypočítajte počet krvných doštičiek na všetkých 25 štvorcoch v rámci jedného veľkého štvorca hemocytometra, odpočítavajte zľava doprava v prvom rade a potom z druhého riadku doľava doprava, kým sa všetky riadky nevykonajú.

Vynásobte počet buniek spočítaných o 1000, aby ste dospeli k celkovému počtu krvných doštičiek; napríklad ak počet buniek je 250, potom 250 x 1000 = 250 000 krvných doštičiek na mikrolitr.

Tip

Mali by ste urobiť svoj odhad v oblasti škvrny, v ktorej sa červené krvinky sotva navzájom dotýkajú. Opakujte postup, ak vidíte zhluky krvných doštičiek.